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    植物ELISA試劑盒的基本原理和實驗操作步驟

    點擊次數(shù):1021  更新時間:2020-07-15
       植物ELISA試劑盒的基本原理是:
      ①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。
      ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。
     
      植物ELISA試劑盒的實驗操作步驟如下:
      1、標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可在小試管中進行稀釋。
     
      2、加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
     
      3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
     
      4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
     
      5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
     
      6、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
     
      7、溫育:操作同3。
     
      8、洗滌:操作同5。
     
      9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
     
      10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
     
      11.、測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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