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    停乳鏈球菌PCR檢測試劑盒操作方法

    點(diǎn)擊次數(shù):767  更新時間:2021-05-19

    停乳鏈球菌PCR檢測試劑盒操作方法:
    一、樣品 RNA 的制備
    1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
    2、或柱式病毒 RNAout。
    二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
    1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
    2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
    3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
    反應(yīng)終體積為 20μL。
    4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
    5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

    停乳鏈球菌PCR檢測試劑盒檢測程序:
    1.  加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
    2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
    3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
    4.  洗板:同前。
    5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
    6.  洗板:同前。
    7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
    8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
    9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

    小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA Kit
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