膠體金可用多種方法制備，其中應用較為廣泛的是化學還原法。這一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的還原劑，使金離子還原為金原子，可用于制備膠體金的還原劑有50余種，但在生物醫(yī)學領域內(nèi)zui為常用的還原劑是白磷、檸檬酸三鈉以及鞣酸等。ELISA試劑盒
白磷還原法的建立已有近百年的歷史，由于此法操作較為簡便，制備出來的膠體金顆粒大小較一致，因而應用較為廣泛，現(xiàn)以Faulk和Taylor（1971）的報道為基礎介紹這一方法。
（1）取1%氯化金1.5mli、0.1mol/LK2CO3 1. 2ml,加入120ml雙蒸水。
（2）上述溶液充分攪拌混勻3min以上。
（3）在攪拌條件下將1ml新鮮配制的20%飽和白磷溶液加入上述混合液中，約在5min內(nèi)溶液變?yōu)樽丶t色。
（4）將上述混合液加熱煮沸，直至變成鮮明的橙紅色為止，一般約需10min。
橙紅色的出現(xiàn)表明氯化金的還原反應終止，膠體金制備成功。按上述法制備的金顆粒直徑為（5.6土0.9）nm。ELISA試劑盒
白磷還原法一般只能制備出單一顆粒直徑的膠體金。因此，用于電鏡雙重標記或多重標記時此法顯得有些不足，還需結(jié)合其他方法。Henegouwen等（1986）發(fā)展了傳統(tǒng)的白磷還原法，可制備出多種不同直徑的膠體金，取得了良好的效果，具體方法如下。
（1）取0.5ml新鮮配制的20%飽和白磷溶液，加入到60ml用上述方法制備的膠體金中（5.6nm土0.9nm）充分振搖5rain以上。
（2）將1%氯化金0.75ml及0.1mol/LK2CO3 0.6ml加到上述溶液內(nèi)，振搖數(shù)分鐘溶液變成棕紅色。
（3）將上液煮沸加熱，直至變成鮮明的紅色，一般需10min。ELISA試劑盒
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