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    免疫組化ABC法實驗步驟

    點擊次數(shù):1584  更新時間:2015-11-06

    1、4%多聚甲醛常規(guī)灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃),蠟塊制作,切片,貼片。0.01M PBS清洗5min×3次;抗體

    2、脫蠟、水化:用二甲苯兩次10min,用梯度乙醇由低濃度到高濃度進行水化;

    3、加入0.3%的過氧化氫甲醇溶液(甲醇80ml+0.01M PBS 100ml+30%過氧化氫)30min,以消除內(nèi)源性過氧化物酶的影響,0.01M PBS清洗5min×3次;

    4、加入0.3% Triton X-100(0.3ml Triton X-100+0.01 M PBS 100ml)30min,以增加細胞的通透性,0.01M PBS清洗5min×3次;

    5、加入用血清稀釋液(牛血清白蛋白1.00g+0.01M PBS 100ml+疊氮納0.08g)稀釋的一抗,4℃存放24-48h。吸去抗體,0.01M PBS洗5min×3次;

    6、加入0.01M PBS稀釋的的二抗,室溫孵育2h。0.01M PBS洗5min×3次;

    7、加入ABC復(fù)合物之類的抗體,室溫孵育2h,0.01M PBS洗5min×3次;蒸餾水迅速沖三次;

    8、加入顯色液,進行免疫組織化學顯色,時間一般3~10min,可不時在顯微鏡下進行觀察,待細胞著色而背底顏色較淡時馬上吸去顯色液,用蒸餾水迅速沖三次后加入0.01M PBS終止反應(yīng);

    9、蘇木素復(fù)染;

    10、梯度酒精脫水之后,透明,封片,拍照。

    Harpagoside 哈巴俄甙;哈巴脂苷 *: 哈巴俄苷 規(guī)格: 19210-12-9 20mg/支
    Harpagide 哈帕苷; 哈帕甙; 瓜鉤草苷 *: 哈巴苷 規(guī)格: 1835927 20mg/支
    Angoroside C 安格洛苷C *: 安格洛甙C 規(guī)格: 115909-22-3 20mg/支
    10-Deacetylbaccatin III 10-脫巴卡?、?*: 10-脫乙酰巴卡亭 規(guī)格: 32981-86-5 20mg/支
    Timosaponin BII 知母皂苷B2 *: 知母皂苷BII 規(guī)格: 136656-07-0 20mg/支
    Timosaponin A3 知母皂苷AⅢ; 知母皂苷A-III *: 知母皂苷A3 規(guī)格: 41059-79-4 20mg/支
    Byakangelicin 比克白芷內(nèi)酯; 比克白芷素 *: 白當歸素 規(guī)格: 19573-01-4 20mg/支
    Corynoxeine 柯諾辛因堿 *: 去氫鉤藤堿 規(guī)格: 630-94-4 20mg/支
    Isocorynoxeine 異柯諾辛因堿 *: 異去氫鉤藤堿 規(guī)格: 51014-29-0 20mg/支
    Ophiopogonin D *: 麥冬皂苷D 規(guī)格: 41753-55-3;945619-74-9;11054-29-8;11088-12-3 20mg/支
    抗體Brazilin *: 巴西蘇木素 規(guī)格: 474-07-7 10mg/支
    Tenuifolin 細葉遠志皂甙 *: 細葉遠志皂苷 規(guī)格: 20183-47-5 20mg/支
    Scopolamine butylbromide 丁溴東莨菪堿; 溴丁東莨菪堿 *: 丁溴酸東莨菪堿 規(guī)格: 149-64-4 20mg/支

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