傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

NCI-H1915人非小細胞肺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據(jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GMP Synthase： 谷酰胺轉移酶GMPS抗體 大鼠腦膜細胞RMC

PC-3M細胞，人前列腺癌細胞 兔主動脈平滑肌細胞,CCC-SMC-2細胞 人真皮成纖維母細胞-HDF-a 人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA 試劑盒 IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗人IgM 0.1ml

GMPPB： GDP甘露糖焦0酸化酶B抗體 EML2 Others Human 人 EML2 / TLT2 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-M004小鼠氣管上皮細胞培養(yǎng)基100mL 人脫氧核糖酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA 試劑盒 IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗人IgM 0.1ml

GPBAR1： G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1 0.2ml

Nox1： 有絲分裂氧化酶1抗體 SGK3 Others Human 人 SGK3 / SGKL 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

(含100mL 酶解緩沖液) 10mL 大鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 p53(Mouse p53/tumor protein)  小鼠p53 96T

NADPH oxidase 3： NADPH oxidase 3抗體 22RV1細胞，前列腺癌細胞 人肝癌細胞,Bel-7405細胞 CL-0024Anglne(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2

HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠Ⅹ(F10)ELISA試劑盒 cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate)  小鼠環(huán)0酸鳥苷 96T

NADPH oxidase 4： NADPH氧化酶NOX家族的成員4抗體 小腸血管內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

NCI-H1915人非小細胞肺癌細胞CXCL16 Others Rat 大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 人細胞裂解液 (陽性對照) 牛支原體ELISA試劑盒 PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c) 0脂酸0酸酶2C(抗原) 0.5mg

phospho-c-Jun(Thr93)： 0酸化原癌基因c-Jun抗體 小鼠漿細胞瘤;MPC-11

L929細胞，小鼠肺成纖維細胞 SGC7901(胃腺癌細胞) 大鼠腦膠質瘤細胞;C6 牛載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 PEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽 0.5mg

JAK2： 蛋白質酪酸激酶JAK2抗體 ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腎系膜細胞cDNAHRMC cDNA 牛孕激素/(PROG)ELISA 試劑盒 PTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原 0.5mg